ПРОТОКОЛ О ПОРЯДКЕ СБОРА, ХРАНЕНИЯ И ОТПРАВКИ БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА В МИКРОБИОЛОГИЧЕСКУЮ ЛАБОРАТОРИЮ
В медицинской клинике сотрудничество с микробиологической лабораторией является действенным инструментом для определения диагноза и назначения целенаправленной антибиотикотерапии.
Постоянно растет число запросов на проведение микробиологических исследований, которые позволяют непосредственно выделить этиологический агент, вызывающий заболевание, и провести тест на чувствительность к антибиотикам (антибиограмма).
«В экосистеме больницы» массовое использование антибиотиков вызывает отбор в популяции бактерий, что приводит к все более частому появлению «новых патогенов» и особенно устойчивых штаммов бактерий, для которых своевременное прямое микробиологическое исследование становится все более необходимым.
Более того, прямое выделение этиологического агента из культуры и определение чувствительности к различным молекулам позволяет избежать необходимости повторных непрямых серологических исследований и сразу же применить соответствующую терапию, что дает значительные экономические преимущества.
По всем вышеперечисленным причинам сотрудничество между всеми заинтересованными специалистами здравоохранения является необходимым для того, чтобы обеспечить друг друга полезной информацией для правильного подхода к современным диагностическим технологиям.
Поэтому правильное выполнение условий сбора, сохранения и транспортировки образца имеет двоякое значение:
l. Чтобы избежать «рассеивания» патогенов, особенно устойчивых микробов (MRSA, Pseudomonas spp), которые косвенно увеличивают заболеваемость госпитальными инфекциями
2. Результат бактериологического исследования будет качественным и быстрым
Основной предпосылкой для получения хорошего микробиологического результата является правильный сбор, хранение и транспортировка анализируемого образца; в связи с этим здесь будут приведены некоторые уже известные концепции о методах сбора образцов, а также некоторые процедурные указания по правильному хранению и транспортировке образцов.
1. Каждый образец должен быть проанализирован в кратчайшие сроки
2. Все биологические жидкости должны рассматриваться как потенциально инфицированные
3. Во время маневров, которые могут привести к несчастным случаям из-за брызг или биологического заражения, используйте оборудование, предоставленное отделом и службами
4. Выполнить отбор проб с использованием правильных процедур для получения надежных результатов
5. Правильно написать как на контейнерах, так и на запросе имя пациента и вид необходимого обследования
6. Свяжитесь с микробиологом в случае процедурных сомнений и/или совета по наиболее подходящему методу для получения более быстрого и достоверного результата и/или для сообщения о событиях, выходящих за рамки обычного
7. Всегда заполняйте запрос во всех его частях, указывая вид обследования, проводимую антибиотикотерапию
8. Избегать загрязнения бутылок взятым биологическим материалом
Коллекционный материал
— специальные флаконы, содержащие универсальный культуральный бульон, подлежащий хранению при комнатной температуре
— иглы и/или наборы, необходимые для сбора
— стерильные перчатки и марля
— дезинфицирующее средство для кожи
Процедура инкассации
— Подготовьте кожу, обезжирив ее 70% этиловым спиртом и продезинфицировав хлоргексидиновым спиртом
— дезинфекция крышки бутылок
— возьмите образец, не касаясь пальцами продезинфицированной кожи, в противном случае наденьте стерильные перчатки
— возьмите 5-8 мл венозной крови на флакон (один для анаэробных микробов, другой для аэробных микробов, легко узнаваемых по этикетке)
— не вводите воздух в бутылки и не заполняйте их полностью
— напишите данные пациента на флаконах, стараясь не закрывать штрих-код (если он есть)
— проводить посев крови до начала любой антибиотикотерапии; для пациентов, уже получающих терапию, проводить посев крови непосредственно перед введением новой дозы антибиотика. В последнем случае лаборатория предоставит специальные флаконы, содержащие смолы для адсорбции молекул антибиотиков.
— по возможности немедленно отправить в микробиологическую лабораторию
— если это невозможно, хранить при комнатной температуре до 48 часов (автоматические системы, как указано на этикетке) или в термостате при температуре +35/37 (для ручных систем)
Форма запроса
— заполнить бланк запроса полностью, указав любую особую ситуацию пациента
— указать при подозрении на инфекцию бруцеллыдля продления инкубационного периода) или инфекцию криптококка
— Укажите любую проводимую антибиотикотерапию
— Обычно рекомендуется взять три образца с интервалом в 15-30 минут от начала дрожи или повышения температуры, возможно, из разных областей.
— Пробы могут быть повторены через несколько дней в случае особых требований (подозрение на эндокардит, антибиотикотерапия)
— посевы крови на MAC (Mycobacteriumavium complex):
этот поиск обычно проводится для пациентов с ослабленным иммунитетом.
— Этот тест следует проводить, уведомив микробиологическую лабораторию, которая предоставит соответствующие флаконы, содержащие селективный культуральный бульон для микобактерий. Затем проведите отбор около 2,5 ми венозной крови в пробирки, следуя инструкциям, приведенным выше.
Коллекционный материал
— — Стерильный контейнер с широким горлом и завинчивающейся крышкой
— — клейкий стерильный пакет для детей младшего возраста
— — моющее средство, стерильная марля
— способ сбора в сотрудничающих лицах, как взрослых, так и детей
— предложить пациенту продолжить мытье рук и провести тщательное мытье половых органов
— попросите пациента не загрязнять внутреннюю часть контейнера руками.
— объяснить пациенту правильную процедуру взятия образца: первое мочеиспускание утром или не менее чем через три часа после последнего мочеиспускания
*отбросить первую струю и, не прерывая мочеиспускания, непосредственно собрать промежуточный позыв в соответствующий контейнер
заполните контейнер не более чем наполовину (не менее l0mI) и плотно закрутите крышку, следя за тем, чтобы моча не вытекала
Метод сбора для несговорчивых детей:
— Проведите тщательное мытье половых органов
— Промокните насухо стерильными салфетками
— Подготовить и применить пакет для сбора мочи, используя асептическую технику, и удерживать его на месте в течение 20-40 минут
Сразу же после мочеиспускания соберите мочу следующим образом:
— подготовка приемного сосуда с использованием асептической техники
— извлечение сумки и закрытие сумки
— введение извлеченного пакета в контейнер с использованием асептической техники
— закрыть контейнер винтовой крышкой
пожалуйста, обратите внимание, альтернативный вариант сбора через катетер мочевого пузыря:
в связи с частотой возникновения ИМП в результате практики, его использование должно быть ограничено особыми случаями:
— пациенты, не способные к сотрудничеству
— проблемы при оценке низкой бактериальной нагрузки*
Способы сбора через постоянный катетер
Способ сбора:
— Зажмите трубку для отвода мочи за час до сбора
— Дезинфицировать место, где будет взят образец
— Соберите мочу с помощью стерильного шприца в необходимом количестве (примерно l0 mI)
— Пипетируйте мочу в стерильный контейнер
— не собирайте мочу из мешка
как собрать образец мочи для исследования на микобактерии
Моча для этого исследования может быть собрана двумя различными способами:
a. «ПЕРВОЕ МИТТО» в течение трех дней подряд (Первое мочеиспускание)
Три образца должны быть помещены в три разных стерильных контейнера и помечены «BK» в дополнение к личным данным пациента
b. «24-HOUR URINE» в единичном сборе, который должен храниться при температуре +4° и отправляться по всему миру в лабораторию в соответствующих пластиковых контейнерах объемом 2000 мл с завинчивающейся крышкой, плотно закрытых. Между мочеиспусканиями в период сбора пробы необходимо хранить в прохладном месте или при температуре +4°C
1. Образец культуры мочи должен использоваться только для этого исследования. для выявления БК требуется другой образец
2. Любой пролив биологического материала для исследований ВК должен быть немедленно нейтрализован с использованием соответствующих дезинфицирующих средств, таких как фенол или гипохлорит (см. Протокол по дезинфицирующим антисептикам)
3. Моча, содержащая не менее 100 000 КОЕ/мл, считается инфицированной:
поэтому важно избегать увеличения бактериальной нагрузки или ее уменьшения (из-за плохого хранения или загрязнения)
— Отправить образец в лабораторию, если возможно, как можно скорее,
— Хранить собранный образец при температуре + 4° (в холодильнике) не более 24 часов.
Форма запроса
Заполните запрос в каждой части, указав: культура мочи на общие микроорганизмы и мицеты с возможной антибиограммой
— Укажите, запрашивается ли прямое исследование и/или исследование культуры ВК
— Укажите специальные поиски: хламидии, микоплазмы
— Укажите предыдущие изоляции и любую антибиотикотерапию
— Укажите, требуется ли PAR-тест (остаточная антибактериальная потенция)
Коллекционный материал :
— — стерильный одноразовый набор с трубкой для сбора
— — стерильные пробирки с завинчивающимися крышками (см. культуры мочи)
— — стерильные перчатки или стерильные щипцы
Метод сбора
— в случае обильного выделения секрета подсоедините эндобронхиальную трубку непосредственно к одноразовому набору стерильным маневром
— в случае скудного выделения, проводите забор до добавления 3-5 мл стерильного физиологического раствора
— — немедленно отправить в лабораторию
— — если это невозможно, образец можно хранить в течение двух часов при комнатной температуре или при +4° (в холодильнике) до 24 часов;
— для обнаружения легионеллы и BK образец может храниться до 48 часов при +4°C (в холодильнике)
Форма запроса:
— — Заполните форму полностью
— — укажите тип исследования, которое вы намерены провести Общие микробы, мицеты, легионеллы, микобактерии (B.K.), бактериоскопическое исследование
Коллекционный материал
— — Стерильный контейнер с широким горлом и завинчивающейся крышкой (тип для культуры мочи)
Метод сбора
— — Проинформируйте пациента о процедуре, которую вы собираетесь выполнить:
— утром натощак, после правильной очистки полости рта, полоскать рот стерильной дистиллированной водой
— затем непосредственно отхаркивают от пациента в стерильный контейнер, не загрязняя его (избегайте, чтобы образец содержал только слюну)
— — немедленно отправить в лабораторию
— — если это невозможно, образец можно хранить в течение двух часов при комнатной температуре или в холодильнике при температуре + 4°C не более 12 часов
— — для обнаружения Legionella и BK образец может храниться до 48 часов при температуре + 4°C (в холодильнике)
Форма запроса
— — Заполните все части бланка запроса, указав тип исследования, которое вы намерены провести: обычные микробы, мицеты, легионеллы, микобактерии (Б.К.)
— в случае бактериальной пневмонии достаточно одного достоверного образца
— при подозрении на туберкулезную или грибковую инфекцию необходимо взять три образца мокроты, взятые три утра подряд
Коллекционный материал
— Стерильный контейнер для сбора материала с лопаточкой и завинчивающейся крышкой
— Тампоны с транспортной средой Amies
Методы коллекционирования
— специальным шпателем соберите небольшое количество фекалий (ЗАПОЛНЯЙТЕ ТОЛЬКО КОНКУРЕНТНУЮ ЧАСТЬ СПАТУЛА!), стараясь по возможности собрать фекалии в середине фекальной массы, выбирая наиболее слизистые и кровянистые части
— для ректальных мазков используйте транспортную среду типа Amies:
— введите тампон в ректальный канал примерно на два см и оставьте его введенным на 30 секунд, поворачивая его к стенкам слизистой. Извлеките и поместите в транспортный носитель
Отправить в лабораторию как можно скорее, если это невозможно:
— образец кала можно хранить в холодильнике при температуре +4° C не более 12 часов
— ректальный мазок можно хранить при комнатной температуре до 48 часов
ПРИМЕЧАНИЕ: для обнаружения токсина A токсина Clostridium difficile, ротавируса, аденовируса, возьмите два образца и обратитесь в микробиологическую лабораторию за любой дополнительной информацией.
Форма запроса
В форме запроса укажите:
— Ко-культура и возможная антибиограмма: в этом случае проводится поиск Salmonella — Shigella — Staphylococci и сообщается о возможных дисмикробах
— Для других патогенов, пожалуйста, укажите, какой поиск предназначен:
ИЕРСИНИЯ, КАМПИЛОБАКТЕР, ЭНТЕРОПАТОГЕННАЯ КИШЕЧНАЯ ПАЛОЧКА -РОТА/АДЕНОВИРУС, КЛОСТРИДИЯ ДИФФИЦИЛЕ, ХОЛЕРНЫЙ ВИБРИОН
—ОБРАТИТЕ ВНИМАНИЕДЛЯ ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКОЙ ЭКСПЕРТИЗЫ СТОЧНЫХ ВОД используйте специальную бутылку с жидкой транспортной средой (формалином) и храните ее при комнатной температуре до 72 часов после сбора; уточните, требуется ли конкретное исследование (амебы, лямблии, криптоспоридии и т.д.)
Коллекционный материал
— Стерильные (не менее двух) одноразовые пластиковые пробирки с завинчивающимися крышками
— Отбор проб и перевязочный материал
Процедура инкассации
— Проведение дезинфекции кожи
— Надевайте стерильные перчатки
— Собирать асептически, в количестве примерно 3-5 мкл на пробирку
Образец должен быть отобран, и лаборатория должна быть проинформирована об этом заранее, так как он НЕ МОЖЕТ ХРАНИТЬСЯ В ОТДЕЛЕ ХРАНЕНИЯ, потому что его необходимо немедленно посеять на соответствующую среду (которая должна быть подготовлена предварительно нагретой до комнатной температуры)
Это связано с лабильностью таких микроорганизмов, как менингококк или гемофильная палочка, которые вместе с пневмококком являются одними из наиболее частых этиологических агентов бактериального менингита
Форма запроса
— Укажите, требуется ли исследование на бактерии, грибы, вирусы или БК
— Очевидное заполнение запроса во всех его частях.
ВО ВСЕХ СЛУЧАЯХ ПОЗИТИВА НЕМЕДЛЕННАЯ ТЕЛЕФОННАЯ СВЯЗЬ БУДЕТ ПРЕДОСТАВЛЕНА ОТДЕЛУ/ДЕПАРТАМЕНТУ, КОТОРЫЙ ЕЕ ЗАПРОСИЛ
НАЗАЛЬНЫЕ, НАЗАЛЬНЫЕ И УШНЫЕ ТАМПОНЫ
Коллекционный материал
— мазок, по возможности в альгинате с подходящей транспортной средой тип STUART (мазок из глотки)
— алюминиевый тонкий стержневой тампон с транспортной средой типа Amies (для назальных и ушных мазков)
Метод сбора
— — Выполняйте маневр в асептической манере, избегая контакта с языком, зубными дугами, слуховым проходом и коаной
— — — — поместите тампон в соответствующий футляр и снова закройте его
— — хранить при температуре окружающей среды не более 48 часов
Форма заявления
— — укажите, какой тип поиска вы хотите выполнить: общие микроорганизмы
Обычные микроорганизмы, мицелий, дифтерийная палочка.
В СЛУЧАЕ ОБНАРУЖЕНИЯ МЕНИНГОКОККА НЕМЕДЛЕННО ОТПРАВИТЬ В ЛАБОРАТОРИЮ ПОСЛЕ ТЕЛЕФОННОЙ СВЯЗИ.
ПРИ ПОДСОЗНАНИИ АНГИНЫ ВИНСЕНТА УСТАНОВИТЕ ДВЕ СТРИПКИ НА ЭКРАНЕ, ЕСЛИ ОБНАРУЖЕН B.pertussis, Оповестите лабораторию заблаговременно
Коллекционный материал
— тампон с тонким стержнем и подходящей средой для сбора материала типа Amies
— стерильный сухой тампон
— ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ ХЛАМИДИИ ТРАХОМАТИСИСПОЛЬЗУЙТЕ СПЕЦИАЛЬНЫЙ НАБОР ДЛЯ СБОРА ОБРАЗЦОВ
— ВСЕГДА ГОТОВЬТЕ МАЗОК НА ПРЕДМЕТНОМ СТЕКЛЕ ДЛЯ БАКТЕРИОСКОПИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ (ПРЕДОСТАВЛЯЕТСЯ ИСПЫТАТЕЛЬНОЙ ЛАБОРАТОРИЕЙ)
Метод сбора
— В связи с ограниченным количеством собранного материала, мазки следует готовить непосредственно для окрашивания с помощью сухого стерильного тампона. Выделения для культурального исследования должны быть собраны другим мазком с использованием соответствующих средств транспортировки
— Для стекловидной жидкости используйте стерильные одноразовые шприцы
Условия хранения
— Немедленно отправить образец в лабораторию, если это невозможно, хранить:
— буферы: до 24 часов при комнатной температуре
— для исследования на хламидии: до 48 часов при +4°C (в холодильнике)
— слайды: при комнатной температуре
Форма заявления
Укажите тип поиска, который вы хотите выполнить: обычные микробы, грибки
Укажите, хотите ли вы искать анаэробные микроорганизмы: в данном случае
использовать соответствующие флаконы, предоставляемые лабораторией
НАКОНЕЧНИКИ ВНУТРИСОСУДИСТЫХ КАТЕТЕРОВ, ПРОТЕЗЫ И КУСОЧКИ ДЛЯ БИОПСИИ
Коллекционный материал
— Стерильные контейнеры с широким горлом и завинчивающейся крышкой для культуры мочи
Методы сбора
— наконечники для катетеров:
— очистить деталь и извлечь асептически, избегая прикосновения катетера к коже
— с помощью стерильных ножниц отрежьте кончик катетера (приблизительно 5 см)
— ввести отрезанный кусок, опустив его непосредственно в стерильный контейнер
— хирург стерильно разрезает образец ткани на две части для отправки соответственно в микробиологическую лабораторию (в стерильном контейнере) и в патологоанатомическую службу, где есть показания для микробиологического и гистологического исследования
Отправить как можно скорее в лабораторию
Если нет возможности хранить при температуре + 4°C (в холодильнике) в течение 24 часов,
после добавления 2/3 мл стерильного физраствора
ЕСЛИ ПОДОЗРЕВАЕТСЯ АНАЭРОБНАЯ ИНФЕКЦИЯ, ИСПОЛЬЗУЙТЕ СООТВЕТСТВУЮЩИЕ ФЛАКОНЫ, ПРЕДОСТАВЛЕННЫЕ ЛАБОРАТОРИЕЙ
ЭКССУДАТЫ, ДРЕНАЖНЫЕ ЖИДКОСТИ
Коллекционный материал
— стерильные контейнеры с широким горлом и завинчивающейся крышкой для культуры мочи
— стерильные тампоны с транспортной средой типа Стюарта или Эмиса
— контейнеры или комплекты для транспортировки анаэробных микробов
Методы коллекционирования
— когда есть возможность сбора непосредственно из дренажа в стерильный контейнер
— Взятие шприца через неповрежденную кожу (выделения в различных местах): продезинфицируйте кожу и выполните взятие шприца асептически
— Взятие шприца через стерильные тампоны Amies с дезинфекцией свищевого отверстия
— Экссудаты и дренажи: берутся тампонами, которые можно хранить в течение 24 часов при комнатной температуре
— Экссудаты и дренажи со шприцем отправить немедленно или хранить до 24 часов при +4°C (в холодильнике)
Форма запроса
Укажите, какой тип исследования вы хотите провести: обычные микробы, мицеты, анаэробы, BK
Коллекционный материал
— стерильные тампоны, альгинатный стержень, транспортная среда Стюарта
— стерильная пробирка с 3 мл стерильного физиологического раствора
— стерильная пипетка Пастера
— стерильные «сухие» тампоны
Режим сбора
— очистка наружных половых органов
— сбор по гинекологическим показаниям с помощью стерильного тампона и выполнение двух мазков на предметных стеклах
— взять экссудат с помощью мазка типа Стюарта
— возьмите небольшое количество экссудата пипеткой Пастера или стерильным сухим тампоном и поместите его в пробирку со стерильным физиологическим раствором
Отправить образец в лабораторию, если это возможно, как можно скорее, в противном случае:
— хранить мазок с транспортной средой и предметными стеклами при комнатной температуре не более 24 часов
— для исследования TRICHOMONAS (пробирка с физиологическим раствором) хранить при комнатной температуре не более 4-6 ЧАСОВ
Форма заявления
Укажите тип выполняемого теста: Общие микробы, Кандида, Гарднерелла, Стрептококк гр. В, Трихомонады, Бактериоскопическое исследование
ЭНДОЦЕРВИКАЛЬНЫЕ И УРЕТРАЛЬНЫЕ МАЗКИ
Коллекционный материал
— Стерильные алюминиевые тампоны с тонким стержнем типа Amies
— стерильные сухие тампоны
— Наборы для сбора образцов на хламидии
Методы коллекционирования
— Очистка наружных половых органов
— ввести тампон в эндоцервикс в соответствии с гинекологическими показаниями и вращать его в течение нескольких секунд
— ввести тампон по уро-гинекологическим показаниям примерно на 1,5 см в меатус уретры
— повторить сухим тампоном для мазка на предметном стекле
Отправить образец в лабораторию, если это возможно, как можно скорее, в противном случае:
— хранить тампон с транспортной средой при комнатной температуре до 24 часов
— для исследования на хламидии срок хранения до 48 часов при +4°C (в холодильнике)
— для исследования микоплазмы срок хранения ТОЛЬКО 2 часа при АМБИЕНТНОЙ ТЕМПЕРАТУРЕ
Метод запроса
Укажите тип выполняемого теста: общие микробы, гонококк, микоплазмы и уреаплазмы, хламидии, бактериоскопическое исследование
Коллекционный материал
— Стерильный контейнер с широким горлом и завинчивающейся крышкой для культуры мочи
Метод сбора
— помочиться до сбора материала
— проводить очистку наружных половых органов
— собирать семенную жидкость для мастурбации в соответствующий контейнер, избегая прикосновения к внутренней стороне и краям контейнера
хотя без загрязнения контейнера
— закрыть винтовой крышкой
ПРИМЕЧАНИЕ: ЕСЛИ ОДНОВРЕМЕННО ТРЕБУЕТСЯ ПРОВЕДЕНИЕ СПЕРМИОГРАММЫ, СБОРУ МАТЕРИАЛА ДОЛЖНО ПРЕДШЕСТВОВАТЬ НЕ МЕНЕЕ ТРЕХ ДНЕЙ ВОЗДЕРЖАНИЯ
Отправить как можно скорее в лабораторию